CULTIVO DE PROTOPLASTOS PDF

Muzragore Tema 9. This technique is a tool for somatic hybrid characterization Culhivo et al. Plant material and protoplast isolation. Protoplast fusion, culture and regeneration Prior to fusion, protoplasts from S. Chromosome observations indicated that all hybrids were aneuploids.

Author:Mezigar Arabei
Country:Poland
Language:English (Spanish)
Genre:Medical
Published (Last):9 May 2009
Pages:365
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ISBN:217-2-28604-363-1
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Se usa colocndolo en capas delgadas de un medio de 50 a uL. Se usa mezclando en l los protoplastos cuando tenga de C, depositndolo, en capas delgadas, en las cajas petri. Frecuentemente los protoplastos se cultivan en medio lquido y las clulas en divisin o las microcolonias derivadas se cultivan en medios slidos. Se usan generalmente azcares.

Generalmente requieren auxinas citocininas, para la divisin celular. Aislamiento y factores que lo afectan 2. Purificacin 3. Determinacin de viabilidad 4. Cultivo 5. Regeneracin 1. Aislamiento de protoplastos Mtodo mecnico: Posee un bajo rendimiento, es un procedimiento tedioso y presenta una aplicabilidad limitada.

Consiste bsicamente en un choque osmtico para producir plasmlisis celular y ruptura de la pared. Los protoplastos se liberan de las clulas rotas mediante el restablecimiento de su nivel osmtico.

Mtodo enzimtico: Consiste en la incubacin de las clulas en una mezcla de enzimas que degradan la pared celular: celulasas, hemicelulasas y pectinasas. Las preparaciones comerciales de dichas enzimas contienen adems proteasas, nucleasas y lipasas. Factores que afectan la produccin y viabilidad de los protoplastos El tipo de enzimas que se usaran.

La composicin del medio en que actuarn. El material de origen de los protoplastos. Tratamientos pre-enzimticos Osmolaridad 2. Purificacin Es la recuperacin de los protoplastos, incluye la eliminacin de los enzimas por lavado y el paso a un medio de cultivo para la recuperacin de la pared y la promocin de las primeras divisiones celulares de las clulas individuales obtenidas de los protoplastos.

Hibridacin somtica En biotecnologa, la hibridacin somtica es el proceso por el cual se obtienen plantas hbridas que contiene ambos ncleos y ambos citoplasmas a partir de la fusin de clulas o de protoplastos. Los protoplastos son capaces de regenerar su pared celular despus de algunos das de cultivo del medio adecuado.

Determinacin de la viabilidad Toma de oxigeno, Actividad fotosinttica Tinciones Medio de cultivo especfico y complejo Se incuba el material a 25C en condiciones de oscuridad de 5 a 7 das. Se realizan tratamientos y la seleccin del material frente a diversos agentes. Cultivo Medio de cultivo: MS, B5 lquido o slido Osmolaridad Densidad de plaqueo Condiciones de almacenamiento Material vegetal Sales inorgnicas; Estabilizadores osmticos; Reguladores del crecimiento; Extractos naturales como: Extracto de levadura Aminocidos Vitaminas cidos orgnicos Azucares Se cultivan los microcallos obtenidos tras la divisin celular, se cambia en ella la densidad poblacional, la composicin del medio de cultivo, se hace menos exigente y la incubacin se hace con luz.

Regeneracin Regeneracin de plntulas a partir del tejido de callo, mediante modificaciones de la composicin hormonal-mineral del medio de cultivo. Por ultimo se trasplantan y aclimatan las plantas obtenidas en invernadero. Hurtada, et al Cultivos de tejidos vegetales: Mxico, Editorial Trillas.

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